科研感悟——个人经历的研磨发展史
点击：14644 添加时间：2016-12-08 13:15:00 信息来源：昊诺斯
个人经历的研磨发展史
作者：薛守维
大学时跟随李静师姐做毕设，做转基因生菜的，那段时间，师姐每周都要很早去附近的菜市场买新鲜生菜。下图来自网络，买的可没这么干净，我们最看重的是要新鲜。
在整个实验里，有个步骤是提取生菜DNA，不管做什么提取，前处理都是至关重要的，不过当时没有用任何成品的试剂盒，我和老搭档郭江田都是用研钵手工破碎的，第一次没经验，用的是玻璃研钵，就是下面这种（图片来源网络）。
液氮一倒进去就冻裂了，直接七零八碎，光剩一个研磨棒了，可能有没做过的朋友把研钵和蒸发皿分不清楚，下图是玻璃蒸发皿。
一般在实验室里做水质的不挥发物质检测用，圆底的，放在水浴锅上用，需要恒重，所以越轻薄越方便使用，而研钵较厚，外面底部是平的，便于放置在实验台上，内部底部是圆形的，便于研磨，不易产生死角。
下图是陶瓷蒸发皿，一般实验室不会用到了，因为比较笨重，恒重起来很困难，以玻璃蒸发皿做对比，玻璃蒸发皿重量从二十几克到四十克左右，而陶瓷材质的重量多在七十克左右。
好吧，话题有点扯偏了。其实就是把玻璃材质和陶瓷材质做了个对比，下面登场时陶瓷研钵。
陶瓷研钵优点是耐温差大，液氮温度是-196摄氏度，实验室室内温度25摄氏度，直接倒进去不会破坏，倒液氮的目的是在研磨生菜叶片时，迅速降低生菜环境温度，使研磨过程出现的水分随液氮升华掉，最终研磨的成品是粉末状，如果没有加液氮，最终出现的就是菜汁了，不利于转移到下一步操作。
当然，并不是所有的材料都适合加液氮，比如苹果，梨之类的，加液氮可能会形成冰坨状的硬块，不利于处理。这样的应该采用切片的方式处理，加液氮处理的一个前提就是样品要尽量薄，表面积要尽量大，这样才利于水分逸出，当然，个人认为苹果做了切片，如果还有必要的话，是可以尝试加液氮处理的。
下图是液氮罐，外面一般有个软质的保护套，这东西怕磕碰。
加液氮当时是用一个类似于早些年间走街串巷卖酱油醋酒的勺子，类似下图，但材质是金属的，且有挂钩。
整个过程必须确保研钵里一直有液氮，这是研磨成功的保证。基本上一个人负责研磨，一个人负责加液氮，很是费力。两个人都要戴上厚厚的棉手套，不然按着研钵的手会被冻僵的，时刻不要忘记液氮的温度是零下一百九十六摄氏度。
后来在药厂做菌类的DNA提取，那时已经比较先进了，用的是成品试剂盒，里面配置了小型的玻璃珠。不如下面的大，那个很小的。
把需要破碎的菌体连玻璃珠一起放入小离心管，震荡粉碎。比当初的手工研磨算是先进了不少，但如果是做植物组织的，这个方法估计就不适用了。
直到后来，网络上接触的人多了，才知道原来有家专门做研磨前处理的公司，他们产品不光可以减少液氮使用量，而且操作更加简洁方便。从微生物、植物组织、中草药、动物肌肉组织、甚至骨骼，都可以顺利处理。提取DNA时，可以选用自动组织研磨仪，方便后期离心，不用担心转移过程中的污染，根据样品选择各种类型尺寸的钢珠，机器可以设置间歇研磨，设置循环次数，运行时间，以及转速，整个过程全自动化，不光极大的提高了工作效率，而且利于重现试验，减少不同人员个体操作影响。想了解下吗？请记住，昊诺斯。
注：所有图片均来源于网络
作者：薛守维
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